胰酶細(xì)胞消化液(含酚紅)
|
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
包裝
|
|
RT0220
|
胰酶消化液(含酚紅)
|
100ml
|
|
-
|
說(shuō)明書(shū)
|
一份
|
● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
胰酶細(xì)胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶（Trypsin）和0.02%EDTA，不含Ca2＋和Mg2＋，含酚紅。該消化液已用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化，或者一些組織的消化。有EDTA的胰酶比不含EDTA的胰酶消化效果更好，但制備原代細(xì)胞一般不能用含EDTA的胰酶（否則不容易貼壁），用于流式細(xì)胞分析的也不能用含EDTA的胰酶（否則殘留EDTA會(huì)將后續(xù)緩沖液中的Ca離子螯合）。
本胰酶細(xì)胞消化液具有方便快速的特點(diǎn)，通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
● 保存條件：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。
注：由于低溫影響胰酶消化液的pH值，-20℃貯存下溶液有時(shí)會(huì)變成淡黃色，4℃融化后會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)榧t色，這種顏色的變化不會(huì)影響胰酶的消化能力。
● 注意事項(xiàng)：
① 在使用胰酶細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。
② 胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。
● 使用說(shuō)明：
1. 貼壁細(xì)胞的消化：
a) 吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
b) 加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置30秒至2分鐘。
注：不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
c) 顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化，或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)；此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液；加入含血清的完全細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
d) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。
e) 如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000-2000g離心1分鐘，沉淀細(xì)胞，盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 組織的消化：
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。